中国输血杂志

2017, v.30(10) 1117-1120

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不同温度热处理与IgG抗体诱导对红细胞衰亡的影响
The effects of different heat treatment temperatures and IgG antibody induction time lengths on erythrocyte eryptosis

李桢;张印则;周华友;徐华;

摘要(Abstract):

目的探讨不同温度热处理及Ig G抗体诱导对红细胞衰亡的影响。方法设3组分别用50、56及60℃3个温度加热处理2%Rh D+红细胞悬液5、10、20 min;另外设设1组,以Rh DIg G抗体75μL与2%Rh D+红细胞悬液150μL混合,同时设对照组(以PBS代替Rh D),37℃30 g振荡(离心),诱导时间分别为0、16、24、40、48及72 h。用Alexa Fluor 488 Annexin V/Dead Cell试剂盒检测红细胞的衰亡比例。结果流式检衰亡细胞比例(%):50℃/5 min、56℃/5 min、60℃/5 min组分别为1.09±0.32 vs 5.44±0.51 vs 16.35±0.53,50℃/10 min、56℃/10 min、60℃/10 min组分别为1.03±0.17 vs 9.27±0.25 vs 29.42±1.21,50℃/20 min、56℃/20 min、60℃/20 min分别为1.66±0.21 vs17.74±0.81 vs 61.38±4.34(P<0.01);除了50℃/5 min和50℃/10 min 2个组外,同一温度下,各组随着加温时间的延长,衰亡细胞比例增大,不同温度加热20 min时,死亡细胞比例(AV-PI+及AV+PI+红细胞之和)较5 min和10min有所升高,尤以60℃组最为明显,但红细胞破碎严重,检测到的细胞总数较少,死亡细胞比率(%):60℃/5 min、60℃/10 min、60℃/20 min组分别为0.51±0.59 vs 0.46±0.11 vs 6.20±1.70(P<0.01)。抗体诱导试验:诱导时间0、16、24、40、48、72 h的衰亡和死亡细胞的比例(%)各自分别为0.76±0.20、0.07±0.01,6.44±0.22、3.78±0.51,8.29±0.23、6.36±0.24,13.34±0.96、9.27±0.51,15.01±2.07、10.21±2.05,31.20±10.20、10.34±2.06(P<0.01)。结论加热及抗体处理诱导均会引起红细胞衰亡;提示血清学试验中以热处理温度≤56℃、热处理时间<10 min为宜。

关键词(KeyWords): 红细胞;;衰亡;;RhD IgG;;热处理;;流式细胞术

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 深圳市科技计划项目(JCYJ20140403092619633)

作者(Author): 李桢;张印则;周华友;徐华;

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