中国输血杂志

2017, v.30(10) 1121-1125

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筛选及鉴定IgG型单克隆抗-D噬菌体克隆的实验研究
Screening and identification of IgG monoclonal anti-RhD phage clones

吴凡;庄乃保;张印则;苏宇清;梁延连;

摘要(Abstract):

目的利用随机噬菌体12肽库筛选出血型D抗原的模拟多肽并验证。方法采用Ig G型单克隆抗-D筛选噬菌体随机12肽库,测定每轮筛选后洗脱物与抗-Rh D的结合情况。对经特异性筛选得到的阳性噬菌体克隆进行DNA序列测定,将推导出的12肽氨基酸序列进行同源性比较,通过凝集抑制试验验证阳性噬菌体与Ig G型单克隆抗-D的反应。结果随着筛选轮次增加,噬菌体洗脱物与抗-Rh D的结合力逐渐增强。经过4轮淘洗后,得到8个亲和力较强且具有较高重合率的保守区域的12肽序列。凝集抑制实验表明具有相同氨基酸序列的阳性噬菌体对Ig G型单克隆抗-D与Rh D阳性红细胞的凝集反应具有抑制作用。结论随机噬菌体12肽库筛选得到的血型D抗原模拟多肽,为Rh D结构与功能研究及研制针对Rh D新生儿溶血病的新型诊断抗原、制备特异疫苗以及探索新的治疗方法提供实验基础。

关键词(KeyWords): 肽库;;RhD抗原;;细菌噬菌体;;表位

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 深圳市卫生计生系统科研项目(201502008)

作者(Author): 吴凡;庄乃保;张印则;苏宇清;梁延连;

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